重组兔单克隆抗体（Recombinant Rabbit mAb）五大优势

①更广泛的抗体谱②免疫球蛋白结构简单③更高特异性和亲和力④易于人源化⑤优质单抗药的候选应用。

更广泛的抗体谱

从抗体开发的经验来看，兔的免疫系统可以产生识别更多独特表位的抗体。众所周知，兔有不同于人类和小鼠的免疫应答机制，当用外界抗原进行免疫时，兔能产生强于人和小鼠的免疫应答反应。人和小鼠通过组合连接重链的多个VH，D和JH基因片段和轻链的多个V（γ）和J（γ）基因片段来产生它们的主要抗体谱系。第二阶段，体细胞超突变引起基因重排而产生的VJ和VDJ进一步丰富抗体谱，增加了抗体亲和力的多样性。虽然兔子的主要抗体谱系产生机制与人和小鼠类似，但是在第二阶段抗体谱系的产生机制中，不但有体细胞超突变过程，额外还有一个基因转换机制，这就进一步丰富了兔子的抗体谱。也正因如此，兔抗甚至可以识别部分鼠抗不能识别的抗原。当你的实验应用中必须使用具有弱免疫原性的抗原时，选择兔但抗体系是非常明智的策略

免疫球蛋白结构更简单

众所周知，免疫球蛋白为五类，它们由其重链类型定义：IgG为Cγ; Cμ用于IgM; Cα用于IgA; IgE为Cε，IgD为Cδ。研究发现，兔免疫球蛋白为四类(不含IgD)。兔血清中最丰富的免疫球蛋白是IgG，血清浓度为5-20mg/ml。与其他动物的IgG不同，兔IgG没有亚类。与小鼠和人IgG相比，兔IgG在N末端和D-E环中倾向于具有较少的氨基酸，并且在重链的可变区具有额外的二硫键，这可能是使得兔单抗稳定性更高的原因。正是由于兔IgG这种更简单的结构和更稳定的性质，才使得抗体药物开发中关键抗体的分子克隆变的更加容易，也使得实验室中的各种应用实验结果更加稳定。

更高亲和力

高亲和力是免疫试验成功的前提，也是衡量一个优质单抗的基础指标。抗体药物的非特异性相互作用会引起副作用，因此高亲和力对于制备一些优质抗体药物非常重要。大多数单抗的解离常数（Kd）在纳摩尔或亚纳米级别，但是兔单抗的在皮摩尔级，具有更高亲和力。兔单抗的高亲和力和高特异性，使得其具有更好的实验应用潜力。兔单抗在IHC应用中的优异表现也印证了我们的观点，简单可靠的兔单抗已经成为部分科学家的“小红人”。

易于人源化

为了降低单抗药物的免疫原性，目前，已经有多种方法可以使抗体中的动物基因含量达到最小化，最广泛使用的就是CDR移植。该方法的实质就是将适当的CDR编码区段插入人抗体框架，并在框架区内的一些结构上比较关键的残基被突变回到亲本残基，以此来重建原始抗原的亲和力和特异性。CDR移植后90%的序列是人源的，即使如此他也存在一些问题需要解决：第一，我们还很难去预测那些特定残基对抗体的具体作用。因此，需要比较密集的在体外和体内来测试不同人源化后的版本。第二，CDR移植的抗体显示出对其抗原的亲和力降低，需要基于体外的亲和力成熟来恢复人源化抗体中的亲和力。

最近开发了一种新的人源化技术，称之为Mutational Lineage-Guided（MLG）人源化技术，使RabMAb人源化更加容易。 MLG人源化在概念上和技术上都与CDR移植方法不同。将来自IgG序列集合的重链和轻链（VH和VL）的可变区的氨基酸序列对齐以形成系统发生树。相关抗体根据其序列的相似性进行分组。谱系相关组中的保守序列代表对IgG的结构和功能至关重要的残基。由于这些可变位置通常来自一个亲代B细胞的一组抗体，所以它们必须已被动物免疫系统有效地检查。因此，这些位置处的氨基酸取代人源化抗体应该是良好耐受的，并不牺牲抗体特异性和亲和力。更重要的是，这些变化不仅在框架区域中发现，而且在CDR中也被发现。因此，MLG人源化可以应用于框架区域和CDR的人源化。由于兔脾淋巴细胞数量众多，通过MLG人源化可以产生足够的有生物活性RabMAb来筛选出性能良好的人源化的RabMAb。

优质单抗药的筛选应用

21世纪初，生物医药发展迅速，单抗药已经占有了生物药很大的比重。我们也期望通过筛选优质单抗和药物靶点，来寻找至于肿瘤和癌症的潜在药物。在这个方面，兔子同样比小鼠具有优势，因为兔子中的脾脏含有比小鼠脾脏多出50倍的淋巴细胞。 可以从每个免疫的脾产生数百个抗体库，提供更多数量的识别不同表位的独立单克隆抗体。 因此，可以容易地获得一组具有生物活性的RabMAb用于进一步选择抗体药物引物。 RabMAb产生的稳健性提供了更高的成功率，所以RabMAb具有在相对较短的时间内获得最理想的药物潜力。

结论与展望

兔是众所周知的，可针对许多抗原产生多种抗体，包括在小鼠中不具有免疫原性的磷酸肽，碳水化合物和免疫原。来自兔的多克隆抗体已被证明在实验室中非常有用。然而，免疫期间的不一致和有限的抗体产生量阻碍其临床应用，直到可以产生兔单克隆抗体。但是,第一代兔单抗的发展极大地受到了骨髓瘤细胞系的局限，加之专利的缘故，价格高昂。而第二代兔单抗的出现，巧妙地绕开来骨髓瘤细胞的局限，通过融和噬菌体展示技术、基因工程抗体技术和多种表达和纯化技术，直接筛选有效抗体，成功实现了兔单抗产品的又一次发展。道路是曲折的，前途是光明的。

众多的RabMAb已广泛应用于生命科学研究的各种应用IHC、WB、IP和FCM。 RabMAb已经被证明是免疫组织化学（IHC）中的优异试剂，并且在检测蛋白质的翻译后修饰，例如磷酸化和活化表现极好。此外，科学家还开发了一些RabMAb，用于检测针对癌症的靶向治疗中的生物标志物。兔单抗在科学研究领域的需求也是与日俱增，所以提供优质的兔单抗产品也显得尤为重要.

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